體內(nèi)樣品處理
考點1:體內(nèi)樣品處理的常用方法
(1)去除蛋白質(zhì)法
(2)綴合物水解法
(3)萃取分離法
(4)化學衍生化法
考點2:去除蛋白質(zhì)的方法:
※ 蛋白質(zhì)沉淀法
√ 加與水混溶的有機溶劑脫水
√ 加入強酸生成不溶性鹽
√ 加無機鹽鹽析
※ 蛋白分解法——蛋白水解酶(枯草菌溶素)
考點3:綴合物水解法
※ 酸水解(HCl):簡便、快速,但專一性差
※ 酶水解:β-葡萄糖醛酸苷酶、硫酸酯酶、兩者混合酶,專屬性高
考點4:分離純化與濃集常用方法
※ 液-液萃取——選用與水不相混溶的有機溶劑進行提取
※ 離子對萃取法
※ 固相萃取法——利用柱色譜進行分離
考點5:化學衍生化法
衍生化目的
● 增加組分的穩(wěn)定性
● 改善被測組分的色譜行為
● 增加被測物的檢測靈敏度和選擇性
● 提高對光學異構(gòu)體分離的能力
衍生化方法
● GC——硅烷化、;、烷基化
● HPLC——熒胺、丹酰氯、鄰苯二醛(柱前衍生化、柱后衍生化)
● 手性衍生化法