(八)細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則

　　同學(xué)們應(yīng)重點(diǎn)掌握：1.細(xì)菌學(xué)診斷(1)標(biāo)本的采集原則(2)檢驗(yàn)程序

　　2.血清學(xué)診斷：常用的血清學(xué)診斷方法

　　3.人工主動(dòng)免疫和人工被動(dòng)免疫(1)適應(yīng)性(特異性免疫)的獲得方式(2)人工免疫的概念和常用的免疫制劑

　　1.細(xì)菌學(xué)診斷

　　(1)標(biāo)本的采集原則：嚴(yán)格無(wú)菌操作，在抗生素使用之前采集，采樣后盡快冷藏送檢及做好標(biāo)記。

　　(2)病原菌的檢測(cè)程序：依次是標(biāo)本的采集，直接鏡檢，病原微生物分離培養(yǎng)，抗原檢測(cè)、分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)微生物特異性DNA或RNA、免疫學(xué)試驗(yàn)。

　　2.血清學(xué)診斷

　　(1)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、放射免疫試驗(yàn)(RIA)及免疫熒光試驗(yàn)(IF)

　　ELISA、RIA及IF均為用于檢測(cè)感染者血清中特異性抗體或抗原的方法，均為應(yīng)用標(biāo)記的抗原檢測(cè)血清中抗異性抗體，或應(yīng)用標(biāo)記的抗體檢測(cè)血清中特異性抗原。

　　(2)蛋白印跡試驗(yàn)(Western blot，WB)

　　蛋白印跡試驗(yàn)(WB)是在ELISA應(yīng)用原理基礎(chǔ)上發(fā)展的一項(xiàng)新技術(shù)，用于檢測(cè)微生物的特異性蛋白抗原或患者相對(duì)應(yīng)的蛋白抗體的實(shí)驗(yàn)室診斷方法。若用此試驗(yàn)檢測(cè)患者血清特異性抗體，可用已知微生物蛋白抗原捕捉患者血清中特異性抗體，再結(jié)合酶標(biāo)記抗人抗體并觀察結(jié)果。

　　(3)中和試驗(yàn)(NT)

　　中和試驗(yàn)(NT)為在檢測(cè)病原微生物(病毒、細(xì)菌等)的血清學(xué)試驗(yàn)過(guò)程中，先在被檢血清或其他液體標(biāo)本中加人已知的特異性抗體或抗原，使其發(fā)生中和反應(yīng)后，再檢測(cè)被檢血清中其特異性抗原或抗體。

　　(4)試管凝集試驗(yàn)

　　肥達(dá)氏試驗(yàn)是輔助診斷傷寒或副傷寒病常用的一種血清學(xué)試驗(yàn)，即用已知傷寒沙門氏菌的菌體抗原(O抗原)、鞭毛抗原(H抗原)及甲型或乙型副傷寒桿菌的鞭毛抗原(PA或PB抗原)，測(cè)定人血清中相應(yīng)抗體效價(jià)。

　　3.人工主動(dòng)免疫和人工被動(dòng)免疫

　　(1)適應(yīng)性免疫(特異性免疫)的獲得方式：對(duì)某種感染性疾病的特異性免疫可由病后天然免疫和人工免疫獲得。人工免疫又分為人工主動(dòng)免疫與人工被動(dòng)免疫。

　　(2)人工免疫的概念

　�、偃斯ぶ鲃�(dòng)免疫：是用人工接種的方法給機(jī)體注射抗原性物質(zhì)(疫苗)，使機(jī)體免疫系統(tǒng)因受抗原刺激而產(chǎn)生體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答的過(guò)程。此種免疫應(yīng)答出現(xiàn)較晚，維持時(shí)間較長(zhǎng)，多用于疾病的預(yù)防。

　�、谌斯け粍�(dòng)免疫：為將含有特異性抗體的免疫血清或免疫細(xì)胞因子等制劑，直接注入機(jī)體，使之立即獲得免疫力。此種免疫持續(xù)時(shí)間短。

　　(3)常用的免疫制劑

　　1)人工主動(dòng)免疫制劑：

　�、贉p毒活菌(疫)苗：如卡介苗、布氏桿菌減毒活菌苗等。

　　②滅活菌(疫)苗：如傷寒、百日咳及霍亂死疫苗等。

　�、垲惗舅兀簽榧�(xì)菌外毒素經(jīng)0.3%~0.4%甲醛液處理后，其毒性消失，但仍保留抗原性的生物制品。

　　④亞單位疫苗：如腦膜炎球菌和肺炎球菌的莢膜多糖疫苗。

　　⑤基因重組疫苗或稱基因工程疫苗：將微生物特異性抗原表達(dá)基因，與工程菌(如酵母菌)充足并表達(dá)蛋白質(zhì)產(chǎn)物，經(jīng)純化制成疫苗。最成功的為乙型肝炎重組疫苗。

　�、� DNA疫苗：是將編碼病原表面某種具有保護(hù)性免疫作用的抗原基因插入酵母菌，使之表達(dá)目的基因。處于研究階段。